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热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量的测定

热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量的测定

摘要:通过灌胃正常大鼠甲状腺素片(含T3,T4)制造热证大鼠模型,正常大鼠给药7 d,采用RP—HPLC法检测大鼠肝脏组织中的ATP、ADP,AMP含量。结果表明。热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量与正常大鼠比较有显著差异。本方法简单,结果准确,验证了热证大鼠模型能量代谢加快。

关键词:反相高效液相色谱法;大鼠;肝脏;腺苷酸

甲状腺激素在体内具有广泛的生理作用,其中最主要的是促进组织氧化及产热。以往的研究表明。热证机体代谢旺盛。为探讨热证与机体能量的关系,我们采取灌胃正常大鼠甲状腺素片的方法制造热证大鼠模型,测定大鼠肝脏中腺苷酸含量,并与对照组比较。探讨热证机体与能量代谢的关系。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1仪器LC—10ATVP高效液相色谱仪:SPD-10AVP紫外可见分光检测器:Chromato—solutionlight色谱工作站;AUerge 64R型高速冷冻离心机;手动玻璃匀浆器:C0250型超声波清洗器。

1.1.2 试剂 ATPNa2、ADPNa2、AMPNa2对照品由Sigma公司提供,进口分装,纯度≥98%,批号为070601:磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、高氯酸均为分析纯(广东汕头市西陇化工厂);甲醇为色谱纯(国药集团化学试剂有限公司):试验用水为娃哈哈纯净水;液氮由南昌生化试剂厂提供。

1.1.3动物与药品 成年健康SD大鼠32只,雌雄各半,体重(200±20)g。由江西中医学院实验动物中心提供。甲状腺素片,含药量(T3,T4)为40 mg,批号为070302(浙江尖峰药业有限公司)。

1.2方法

1.2.1 热证大鼠模型制造方法健康SD大鼠32只,随机分成两组,第一组为正常对照组(雌雄各半),灌胃给药0.5%CMC-Na;第二组为热证大鼠模型给药组(雌雄各半),灌胃给予甲状腺素片50mg/(kg·d),甲状腺素片以0.5%CMC—Na

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